پایان نامه بررسی پتانسیل ریزازدیادی و باززایی در تعدادی از ارقام زراعی و گونه های یکساله یونجه

اختصاصی از کوشا فایل پایان نامه بررسی پتانسیل ریزازدیادی و باززایی در تعدادی از ارقام زراعی و گونه های یکساله یونجه دانلود با لینک مستقیم و پرسرعت .

این فایل در قالب ورد و قابل ویرایش در 80 صفحه می باشد .
چکیده
یونجه از جمله گیاهانی است که به طور مکرر مورد مطالعات کشت بافتی به خصوص در زمینه جنین¬زایی قرار گرفته است. باززایی یونجه¬های یکساله بسیار سخت‌تر از باززایی ارقام چندساله می‌باشد. پیشرفت¬های قابل توجهی با استفاده از مهندسی ژنتیک در جهت بهبود ارزش تغذیه¬ای و مقاومت یونجه به تنش¬های زیستی و غیرزیستی حاصل شده است و در حال حاضر یونجه به عنوان یک بیوراکتور سبز برای تولید ترکیبات و متابولیت¬های با ارزش مورد توجه است. پروتوکل¬های مختلف برای باززایی وکشت بافت این گونه‌ها ، اکثرا روش باززایی غیرمستقیم واز طریق جنین زایی بدنی را ارائه نموده‌اند. در پژوهش حاضر باززایی مستقیم گیاه کامل در سه رقم یونجه چندساله و دو گونه یکساله M.rigidula و M.scutellata با استفاده از ریزنمونه گره ساقه مورد بررسی قرار گرفت. بر اساس نتایج حاصل، ترکیب سطوح مختلف تنظیم کننده¬های رشد BAP + NAA و TDZ همراه با AgNO3 بر روی صفت میانگین تعداد جوانه¬های القاء شده و میانگین تعداد شاخساره¬های باززا شده اختلاف معنی¬داری (05/0P < ) در ارقام چند ساله و گونه¬های یکساله نشان داد و محیط کشت - IV  SIM I حاوی TDZ با غلظت پایین (mg/l 1/0) همراه با  mg/l3 AgNO3 تاثیر معنی¬داری از نظر آماری در القاء جوانه و باززایی شاخساره¬ها داشت و رقم قره یونجه و گونه M.rigidula میزان باززایی بیشتری نسبت به ارقام دیگرچند ساله وگونه دیگر یکساله نشان دادند. در حضور ترکیب سطوح مختلف هورمون‌های  BAP(mg/l 1) و NAA(mg/l 2/0) و TDZ (mg/l 1/0) جوانه‌های بیشتری القاء شد و حد اکثر جوانه‌های القاء شده در ارقام چند ساله در محیط کشت¬های حاوی  BAP(mg/l 1) و NAA(mg/l 2/0) و TDZ (mg/l 1/0) همراه با  mg/l3 AgNO3 و در گونه¬های یکساله نیز در محیط کشت¬های حاوی BAP(mg/l 1) و NAA(mg/l 2/0) و TDZ (mg/l 1/0) همراه با  mg/l3 AgNO3 مشاهده شد. گیاهچه¬ها در حضور محیط کشت MS 2/1حاوی ترکیب NAA (mg/l 5/1) وIBA  (mg/l 1)، ریشه¬های حجیم و قوی تولید نمودند. در این تحقیق گونه M. rigidula با اندازه ژنومی دو برابر در مقایسه با گونه M. scutellata پاسخ خوبی نسبت به محیط کشت و باززایی مستقیم نشان داد. دربین ارقام چند ساله نیز، رقم قره یونجه بیشترین پتانسیل باززایی را نشان داد. همچنین بیشترین میزان کالوس در رقم قره یونجه در محیط کشت حاوی  Kin(mg/l 2/0) +2.4-D  (mg/l 1) و casein hydrolysate  (mg/l 500 ) مشاهده گردید ولی باززایی گیاهچه مشاهده نشد. گیاهچه¬های باززا شده از طریق القاء جوانه، به طور نرمال و با زنده مانی 100% به شرایط محیطی غیر استریل سازگار شدند. به نظر می‌رسد پروتکل باززایی مستقیم برای رنج وسیعی از ارقام و گونه¬های یونجه قابل کاربرد باشد.
 
کلمات کلیدی: یونجه چندساله، یونجه یکساله، گره ساقه، باززایی مستقیم، القاء جوانه، کالوس

فهرست مطالب
عنوان                                                                                                                            
فصل اول: کلیات
مقدمه
1-1- تاریخچه و خصوصیات گیاه شناسی یونجه
1-1-1- اهمیت و گیاهشناسی یونجه
1-1-2- ژنتیک و گروه‌های مختلف یونجه
1-1-3- انواع یونجه زراعی داخلی
1-2- اهمیت کشت بافت
1-3- کشت بافت گیاهی
1- 4- تاریخچه کشت بافت یونجه.

فصل دوم: بررسی ادبیات موضوع و سابقه تحقیق
2-1- باززایی درون شیشه¬ای
2-1-1- باززایی مستقیم در یونجه
2-1-2- باززایی غیرمستقیم در یونجه

فصل سوم: روش تحقیق
3-1- رقم مورداستفاده
3-2- محیط کشت، ترکیبات و آماده سازی آن
3-2-1- محلول¬های ذخیره مواد معدنی برای تهیه محیط کشتSH  
3-2-2- محلول های ذخیره مواد تنظیم کننده رشد
3-3- شرایط کشت، ضد عفونی بذر و کشت ریزنمونه¬ها
3-3-1- باززایی مستقیم  از گره ساقه
3-3-2- سازگاری گیاهچه¬ها
3-4- باززایی غیرمستقیم
3- 5- روش و ابزار گردآوری اطلاعات.
3-6- روش آماری و تجزیه داده¬ها

فصل چهارم: تجزیه و تحلیل اطلاعات
4-1- القاء جوانه و باززایی
4-1-1- القاء جوانه در محیط کشت  SIM I
4-1-2- باززایی شاخساره در محیط کشت SIM I.
4-1-3- القاء جوانه در محیط کشت  SIM II.
4-1-4- باززایی شاخساره در محیط کشتSIM II  
4-1-5- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه چند¬ساله و یکساله در القاء جوانه و باززایی شاخساره در محیط کشت SIM I
4-1-5-1- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه¬های چند¬ساله در القاء جوانه در محیط کشت  SIM I
4-1-5-2- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه¬های یکساله در القاء جوانه در محیط کشت  SIM I
4-1-5-3- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه¬ چند¬ساله در باززایی شاخساره در محیط کشت  SIM I
4-1-5-4- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه¬ یکساله در باززایی شاخساره در محیط کشت  SIM I
4-1-6- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه چند¬ساله و یکساله در القاء جوانه و باززایی شاخساره در محیط کشتSIM II
4-1-6-1- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه چندساله در القاء جوانه در محیط کشت SIM II
4-1-6-2- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه¬ یکساله در القاء جوانه در محیط کشت  SIM II.
4-1-6-3- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه چند¬ساله در باززایی شاخساره در محیط کشت  SIM II
4-1-6-4- اثر ژنوتیپ¬های مختلف یونجه یکساله در باززایی شاخساره در محیط کشت  SIM II
4-2- ریشه¬زایی
4-2-1- ایجاد ریشه در یونجه¬های چند¬ساله
4-2-2- درصد ایجاد ریشه در یونجه¬های چند¬ساله
4-2-3- درصد ایجاد ریشه در یونجه¬های یکساله
4-3- سازگاری و انتقال به شرایط گلخانه.
4-4- القاء کالوس در یونجه¬های چند¬ساله و یکساله
4-4-1- باززایی غیرمستقیم از کالوس یونجه

فصل پنجم: نتیجه گیری و پیشنهادات
5-1- یونجه¬های چند¬ساله
5-1-1- باززایی مستقیم  
5-1-1-1- القاء جوانه و باززایی شاخساره تحت تاثیر سطوح مختلف BAP و NAA
5-1-1-2- القاء جوانه و باززایی شاخساره تحت تاثیر TDZ همراه با AgNO3
5-2- یونجه¬های یکساله
5-2-1- باززایی مستقیم
5-2-1-1- القاء جوانه و باززایی شاخساره تحت تاثیر سطوح مختلف BAP و NAA
5-2-1-2- القاء جوانه و باززایی شاخساره تحت تاثیر TDZ همراه با AgNO3
5-3- باززایی غیر مستقیم در یونجه¬های چند¬ساله و یکساله
5-4- نتیجه گیری و پیشنهادات.
فهرست منابع و ماخذ.
 چکیده انگلیسی.