فرمت فایل : WORD (قابل ویرایش)
تعداد صفحات:74
پایان نامه برای دریافت درجه دکترای عمومی دامپزشکی
فهرست مطالب:
عنوان صفحه
چکیده فارسی
فصل اول: مقدمه و هدف
1
فصل دوم: کلیات 2
1-2- ساختار تخمدان 2
2-2- چرخه فحلی در گاو ¬ماده 3
1-2-2- ساختار فولیکولی تخمدان گاو ¬ماده 9
2-2-2- رشد طبیعی و انتخاب فولیکولی 9
3-2-2- هورمون¬شناسی انتخاب فولیکولی 11
4-2-2- شکل تخمدانها در بررسی مافوق¬صوتی 11
5-2-2- مایع¬ فولیکولی 12
3-2- تغییر هورمونها در چرخه ¬فحلی در گاو ¬ماده 12
1-3-2- گنادوتروپینها و هورمونهای هیپوتالاموس 13
2-3-2- استروژن وپروژسترون 14
3-3-2- انسولین 15
4-3-2- IGF-1 15
5-3-2- اینهیبین 15
6-3-2- اکتیوین و فولستاتین 15
7-3-2- فاکتورهای¬رشد 16
8-3-2- لپتین 16
4-2- ادیپوسایتوکینها 17
1-4-2- ادیپونکتینونحوهشناساییآن 18
2-4-2- ساختار ژن و پروتئین ادیپونکتین و گیرنده-های آن 18
3-4-2- ادیپونکتین و سیستم تولید¬مثلی 19
5-2- اساس تست الیزا
22
فصل سوم: مواد و روش کار 23
1-3- وسایل و مواد مورد نیاز 23
2-3- شرح کلیات روش کار 23
1-2-3- نمونه¬گیریکشتارگاهی 24
2-2-3- نمونه¬گیری از حیوان زنده 24
3-2-3- تعیین مراحل مختلف چرخه¬فحلی 24
4-2-3- نحوه انتخاب و اخذ مایع ¬فولیکولی از نمونه کشتارگاهی 25
5-2-3- نحوه انتخاب و جمع¬آوری مایع فولیکولی از نمونه دام زنده 28
6-2-3- تهیه سرم و انجماد 31
4-3- اندازهگیری پروژسترون با رادیوایمیونواسی 32
4-3- اندازهگیری ادیپونکتین با روش الیزا 32
5-3- تحلیل آماری
33
فصل چهارم: نتایج 34
1-4- مقادیر پروژسترون در سرم گاوهای مورد مطالعه 34
2-4- میزان ادیپونکتین در سرم و مایع فولیکولی فولیکول¬های بزرگ 34
3-4- میزان ادیپونکتین در سرم و مایع ¬فولیکولی فولیکول¬های متوسط و کوچک 39
فصل پنجم: بحث
1-5-رابطه پروژسترون سرم خون و ادیپونکتین
2-5- تغییرات ادیپونکتین مایع¬¬فولیکولی و سرمی¬خون
3-5- تغییرات ادیپونکتین مایع ¬فولیکولی فولیکول¬هایپیش از تخمک¬گذاری و فولیکول¬های بزرگ
4-5- تغییرات ادیپونکتینسرم 44
44
46
47
48
پیشنهادات 50
فهرست منابع 51
چکیده انگلیسی 57
فهرست جدول¬ها
عنوان صفحه
جدول 1-3 خصوصیاتمورفولوژیکتخمدانبراساسمعاینهظاهریوتعیینمرحلهچرخه فحلیگاوبراساسآن 27
جدول 4-1 میانگینوانحرافمعیارغلظتپروژسترونسرمی(ng/ml)گاوهادرفازلوتئالوفولیکولار 34
جدول 4-2 میانگینوانحرافمعیارغلظتادیپونکتینسرمیومایعفولیکولیفولیکول هایبزرگ (mg/ml)گاوهادرفاز لوتئالوفولیکولار 35
جدول 4-3 میانگینوانحرافمعیارغلظتادیپونکتینمایع فولیکولیفولیکول هایمتوسطوکوچک (mg/ml) گاوهادرفاز لوتئال
39
فهرست نگاره¬ها
عنوان صفحه
نگاره 1-2 مراحل مختلف چرخه فحلی در گاو ¬ماده 3
نگاره 2-2 ساختارهای اصلی تخمدان در گا¬و ¬ماده 5
نگاره 3-2 مراحل تبدیل تیکای درونی و گرانولوزای فولیکول به جسم¬زرد 6
نگاره 4-2 الگوی موج فولیکولی در طول چرخهفحلی گاو¬ ماده 8
نگاره 5-2 خیزش، انتخاب و غالبیت فولیکولی 10
نگاره 6-2 نمای ماکروسکوپیک به همراه نمایی از سونوگراف فولیکول و تخمدان در گاو¬ ماده 12
نگاره 7-2 روند غلظت پروژسترون در خون جداری گاو¬ ماده در چرخه فحلی 14
نگاره 9-2 ساختمان گیرنده¬های ادیپونکتین Adipo RI و Adipo RII
نگاره 10-2 چگونگی برهم¬کنش LHR و ادیپونکتین در سلول گرانولوزا 19
20
نگاره 1-3 تخمدان کشتارگاهی 26
نگاره 2-3 فولیکول منتخب جهت نمونه¬برداری، قبل از نمونه¬گیری 27
نگاره 3-3 تصویر شماتیک روش اخذ مایع فولیکولی در گاو زنده 29
نگاره 5-3 تصویر شماتیک روش اخذ مایع فولیکولی در گاو زنده 29
نگاره 4-1 مقایسهغلظتادیپونکتینسرمخونومایعفولیکولفولیکول-هایبزرگدردوگروهفولیکولارولوتئال 35
نگاره 4-2 نمودار همبستگی¬ها میانغلظتادیپونکتینسرمخون،مایعفولیکولفولیکول-هایبزرگوپروژسترونسرم ¬خونبدوندر نظرگرفتندوگروهفولیکولارولوتئال 36
نگاره 4-3 نمودار همبستگی¬ها میانغلظتادیپونکتینسرم -خون،مایعفولیکولفولیکول¬هایبزرگوپروژسترونسرم ¬خوندرگروهلوتئال 37
نگاره 4-4 نمودار همبستگی¬ها میانغلظتادیپونکتینسرمخون،مایعفولیکولوپروژسترونخوندرگروهفولیکولار 38
نگاره 4-5غلظتادیپونکتیندرسرمخون ومایعفولیکولی
نگاره4-6غلظت ادیپونکتین در سرم خون، مایع فولیکول در گروه لوتئال 39
40
نگاره 4-7نمودار همبستگی¬ها میانغلظتادیپونکتینسرمخونومایعفولیکولدرفولیکول-هایمتوسط وکوچکدرگروه لوتئال. و نمودار همبستگی میانغلظت ادیپونکتین مایع¬فولیکول در فولیکول¬های متوسط و کوچک درگروه لوتئال 41
نگاره 4-8 نمودار همبستگی¬ها میانغلظتادیپونکتینمایعفولیکولیوپروژسترونخوندرفولیکول-هایبزرگ، متوسط،کوچکدرگروهلوتئال 43
چکیده
ادیپونکتین یکی از آدیپوسایتوکینهای مترشحه از بافت چربی، انسان و حیوانات اهلی است. نقش فیزیولوژیک ادیپونکتین در رشد فولیکولها، اووسیت و تخمکگذاری هنوز به طور کامل شناسایی نشده است. در خصوص میزان غلظت ادیپونکتین در سرم خون و مایع فولیکولی در گاو ¬ماده اطلاعاتی موجود نیست. لذا مطالعه حاضر مطرح شد به منظور تعیین: 1) میزان ادیپونکتین در سرم خون و مایع فولیکولی 2) بررسی ارتباط غلظت ادیپونکتین در سرم خون و غلظت مایع فولیکولی در سایزهای متفاوت فولیکول در فاز فولیکولار و لوتئال در چرخه فحلی از گاو ماده. انجام این مطالعه به دو بخش تقسیم شد. بخش اول، نمونه¬گیری از 20 تخمدان کشتارگاهی گاو شیری هلشتاین به همراه نمونه خون آنها بود. در آزمایشگاه، مایع فولیکولی از فولیکول¬ها با دیواره خارجی شفاف و سالم و مایع فولیکولی روشن در سه اندازه متفاوت فولیکول (3-5 میلی¬متر، بین 6 تا 8 میلی¬متر و بزرگتر از 10 میلی¬متر ) جمع آوری شد. بخش دوم، مرحله¬ی چرخه فحلی در 8 گاو ماده با سونوگراف تعیین گردید، سپس با پروستاگلاندین¬¬اف¬¬دو¬آلفا القا فحلی شدند و تائید رشد فولیکولی نیز توسط سونوگراف صورت پذیرفت. زمانی که گاوها فحل شدند نمونه خون و مایع فولیکولی فولیکول پیش تخمک¬گذار جمع¬آوری شد. مایع فولیکولی فولیکول پیش تخمک¬گذار با تکنیک آسپیره کردن داخل رکتومی با سرسوزن بلند ( سایز 21 ) جمع¬آوری شد. اندازه¬گیری میزان پروژسترون سرم ¬خون به روش رادیوایمنواسی (Immunotech kit Marseille France) انجام شد. میزان ادیپونکتین در سرم ¬خون و مایع ¬فولیکولی نیز به ¬وسیله کیت اندازه¬گیری ادیپونکتین گاو (Bovine Adiponectin. Cusabio Biotech Co. Ltd. China) به روش الیزا انجام شد. برای مقایسه آماری غلظت ادیپونکتین مایع ¬فولیکولی و سرم-خون و همچنین غلظت پروژسترون در سرم¬ خون بین گروه لوتئال و فولیکولار از آزمون تی¬مستقل با نرم¬افزار اس-پی¬اس¬اس (edition 5/11, under Windows, Chicago, Illinois, USA) استفاده ¬شد. برای مقایسه همبستگی بین غلظت ادیپونکتین مایع -فولیکولی و سرمی¬ خون و غلظت پروژسترون در گروه¬های لوتئال و فولیکولار از آزمون اسپیرمن استفاده¬شد. سطح معنی¬داری 05/0P< در نظر گرفته¬ شد. مطالعه حاضر نشان-داد میزان ادیپونکتین مایع فولیکولی در فولیکول¬های بزرگ و فولیکول¬های متوسط و فولیکول¬های کوچک در طول چرخه¬فحلی تفاوتی ندارد (05/0P<). در فاز لوتئال از چرخه¬ فحلی، رابطه مثبت معنی¬دار بین غلظت پروژسترون سرم¬ خون و غلظت ادیپونکتین مایع¬ فولیکولی فولیکول-های متوسط وجود داشت(05/0P<). میانگین غلظت ادیپونکتین ¬سرم و مایع¬ فولیکولی فولیکول¬های بزرگ در فاز ¬لوتئال از چرخه ¬فحلی در گاو¬ ماده، به ¬طور معنی-داری بیشتر از فاز¬ فولیکولار بود (05/0P<). در نتیجه مرحله¬ی چرخه¬فحلی از عوامل موثر در میزان ادیپونکتین سرم¬ خون است. علاوه بر این، به نظر می¬رسد ادیپونکتین مایع فولیکولی بر رشد فولیکول در فاز لوتئال و فولیکولار چرخه فحلی در گاوهای شیری تاثیری ندارد.