تحقیق صنایع غذایی اثر آنتی اکسیدان های عسل 4ص

اختصاصی از کوشا فایل تحقیق صنایع غذایی اثر آنتی اکسیدان های عسل 4ص دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 4

اثر آنتی اکسیدان های عسل

ارزش غذایی عسل بر کسی پوشیده نیست . گذشته از آن عسل دارای خواص و مواد دارویی ارزشمندی است که بررسی ها ، هر روز ابعاد گسترده تری از آن را روشن می سازد.

ارزش غذایی عسل بر کسی پوشیده نیست . گذشته از آن عسل دارای خواص و مواد دارویی ارزشمندی است که بررسی ها ، هر روز ابعاد گسترده تری از آن را روشن می سازد.

عسل فرآورده ای است که از مصرف شهد گیاهان مختلف توسط زنبور عسل و تغییرات آن در بدن زنبور، در شانه ی موجود در کندو ایجاد می شود.

تحقیقات جدید مدارک بیشتری را مبنی بر سودمند بودن عسل ارائه می کنند. متخصصین علوم تغذیه در دانشگاه کالیفرنیا دریافته اند که سطح آنتی اکسیدان های بدن، در افرادی که روزانه چند قاشق سوپ خوری عسل می خورند بالا می رود.

یک محقق در امر تغذیه می گوید: با مصرف عسل ، سیستم دفاعی بدن در برابر استرس اکسیداتیو ناشی از رادیکال های آزاد افزایش می یابد، لذا می توان عسل را در یک برنامه غذائی سالم جای داد.

کودکان کمتر از یک سال نباید عسل بخورند زیرا ممکن است به طور مناسب آن را هضم نکنند.

درحالی که شهرت این ماده به عنوان یک شیرینی فاسد شونده باعث می شود به ندرت به عنوان یک غذای سالم در نظر گرفته شود ، مدت طولانی است که بحث در باره اثرات شفابخش آن در جریان است. برخی افراد از آن برای درمان زخم استفاده می کنند.

محققان در حال ارزیابی اثر عسل بر سطح آنتی اکسیدان های بدن هستند که به نظر می رسد بدن را از مضرات محیط مانند دود سیگار و مواد شیمیائی حفاظت می کنند.

در یک تحقیق جدید از ۲۵ نفر خواسته شد بسته به میزان وزنشان ، هر روز و به مدت یک ماه بین ۴ تا ۱۰ قاشق سوپ خوری عسل گیاه گندم سیاه بخورند.

این عده عسل را تقریبا به هر شکلی که می توانستند خوردند، ولی به صورت پخته یا حل شده در چای نبایستی مصرف می شد.

برخی عسل را بر روی نان تست یا با موز و کره بادام زمینی مصرف می کردند، اما بسیاری هم به سادگی قاشق عسل را در دهان می گذاشتند.

دانشمندان دریافتند سطوح آنتی اکسیدان های بدن در افرادی که عسل خورده بودند افزایش یافته است.

متخصصان معتقدند آنتی اکسیدان ها از صدمات سلولی ایجاد شده توسط مولکول هایی به نام رادیکال های آزاد جلوگیری می کنند.

غذاهای غنی از آنتی اکسیدان ها از اثرات تخریبی رادیکال های آزاد می کاهند و در نتیجه احتمال بیماری هائی همچون سرطان و حمله قلبی را کاهش می دهند.

Nicki J.Engeseth متخصص دیگر در زمینه عسل ، از دانشگاه ایلی نویز که به مطالعه آنتی اکسیدان ها و عسل پرداخته، می گوید یافته های یک مطالعه جدید نشان می دهند که حتی اگر ۸۰ درصد عسل قند باشد، باز هم سالم است.

عسل مملو از ترکیبات مختلفی است که فعالیت بیولوژیک قوی دارند و حتی ممکن است خواص میکروب کشی نیز داشته باشد.

عطر و رنگ این ماده غذایی بستگی به نوع گل هایی دارد که گرده افشانی آنها توسط زنبور عسل صورت می گیرد و محققان نمی دانند که آیا برخی از انواع برای خوردن سالمترند یا خیر؟

در مورد این مطالعه عسل گندم سیاه به دست آمده از گیاه فوق ، یک عسل قهوه ای تیره بوده و عطر تند مشخصی دارد.

همچنین موادی با محتوای قند و کربوهیدرات بالا در عسل وجود دارند. اما افرادی که در مطالعه بالا شرکت داشتند، در مدت یک ماه که تحت عسل درمانی بودند اضافه وزن پیدا نکردند.

در پاسخ به این سوال که آیا عسل بر عادات غذا خوردن آنها تاثیری داشت یا نه ، اکثراً اظهار داشتند که با مصرف عسل به عنوان صبحانه احساس پرتری داشتند.

به نظر می رسد عسل ، معده را برای مدت طولانی تری سیر نگه می دارد و قطعا تمایل زیاد افراد به محصولات شیرین را فرو می نشاند.

در رابطه با افزایش حفرات دندانی ، مطالعات نشان می دهد با آن که عسل چسبنده و شیرین است ، عامل مهمی در ایجاد پوسیدگی دندان محسوب نمی شود.

اما نبایستی افراد عسل را جایگزین میوه و سبزی کنند، اما اگر می خواهند چای خود را با قند شیرین کنند ، به جای آن از عسل استفاده کنند.

تحقیق در مورد آنتی بادیها2

اختصاصی از کوشا فایل تحقیق در مورد آنتی بادیها2 دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

دسته بندی : وورد

نوع فایل :  .doc ( قابل ویرایش و آماده پرینت )

تعداد صفحه : 9 صفحه

---

 قسمتی از متن .doc : 

ساختار وطبقه بندی آنتی بادی :

واحد اصلی سازنده آنتی بادی ها گلیکوپرتئین می باشد با وزن مولکولی 150000 دالتون آنتی بادی شامل چهار زنجیره ی پلی پپتیدی می شود در واقع دو زنجیره سنگین ودو زنجیره سبک که به وسیله پیوندهای دی سولفیدی به هم متصل شده اند . هر زنجیره سبک دارای یک وزن مولکولی حدود 25000 دالتون است وشامل دو قسمت به نام دومین است یک قسمت دومین که ناحیة خاصی در زنجیره است که بوسیله پیوندی سولفیدی به صورت تا خورده درآمده است .

در زنجیره ها قسمت هایی به نام CL , VL وجود دارد . VL قسمت متغیر و CL قسمت ثابت است .

در قسمت VL : ترتیب قرار گرفتن اسیدهای آمینه متفاوت است ولی در قسمت CL ترتیب قرار گرفتن اسیدهای آمینه ثابت است . دو نوع زنجیره سبک وجود دارد:

λ (1

K (2

در انسان %60 از زنجیره سبک و K 40 % است . درحالی که در کل زنجیره سبک L 50 % , K 95 % λ وجود دارد . بنابراین یک مولکول آنتی بادی یکی از انواع را دارد و هرگز دو نوع را نخواهد داشت .

هر زنجیره سنگین درآنتی بادی دارای وزن مولکولی حدود 50000 دالتون است . و شامل قسمتی است که دارای خاصیت ارتجاعی میباشد به نام Variable rigion ، زنجیر سبک و سنگین دارای یک ناحیه هومولوگ ( یکسان ) هستند که ازآمینو اسیدهای متفاوت ساخته شده اند . بخش های یکسان شامل حدود 110 آمینو اسید هستند و نواحی ایمونوگلوبولین نامیده می شوند .

زنجیره سنگین شامل یک ناحیه به نام VH است و هر کدام دارای 3یا4 قسمت میباشند (CH11, CH2,CH4,CH4) ناحیه ای که در زنجیره سنگین دارای خاصیت ارتجاعی است در بین ناحیه CH1 , CH2 قرار دارد . و این خاصیت به آنتی بادی شکل Y می دهد . و اجازه باز و بسته شدن برای جادادن دولبه آنتی ژن را به آنتی بادی می دهد . همچنین زنجیره سنگین در تعیین عملکرد فعالیت مولکول آنتی بادی انجام وظیفه می کند . آنتی بادی دارای پنج نوع ( کلاس ) می باشد . IgG – IgA – IgM , IgD – IgE ، هرکدام بوسیله نوعی از انواع زنجیره سنگین بوجودمی آیند . -(-(-(-(-( ؛Gd – IgE , IgG هر کدام تنها یک ساختار دارند ، درحالی که IgA ممکن است شامل یک یا دو بخش و IgG شامل پنج اتصال دی سولفیدی در ساختارش باشد آنتی بادیهای IgG دارای 4 زیر مجموعه می باشند با وجود این ارگانیسم های تفاوت کمتری در تولید محصول نوع آنتی بادی دارند. تحقیقات روی IgG از نظر ساختار و عملکرد برای کمک به کشف آنزیم های پیسین و با پائین وجود دارد . به صورت تکه های خاص همراه بیولوژی خاص . آنزیم پپسین در برخورد با IgG باعث شکستن آنتی بادی و ایجاد دو ناحیه (Fab) می کند . دو ناحیه Fab به قسمتی از زنجیره سنگین که دارای خاصیت ارتجاعی است اتصال می یابند .چون ناحیه Fab مولکولی دو ظرفیتی است و قادر است آنتی ژن را رسوب دهد . آنزیم پپسین در ناحیه دارای خاصیت ارتجاعی بین CH1 , CH2 دو تکه محصول یکسان به نام ناحیه FC تولید می کند که این نواحی خاصیت حفظ کردن لبه ی آنتی ژن را دارند . البته این ناحیه به آنتی ژن متصل نمی شود . بلکه این ناحیه با مولکول های گلیکوزیدی تشکیل پیوند می دهد و باعث عمل موثر ی مانند : اتصال آنتی بادی به ماکروفاژ و مونوسیت و … می شود . و همین طور عمل تشخیص یکی از انواع آنتی بادی از دیگری

ساختار و عملکرد ایمونوگلوبولین :

اصطلاحات راهنما :

ایمونوگلوبولین حلقوی

ناحیه Fab

قسمت FV

ناحیه بسیار متغیر که در ناحیه اتصال آنتی ژن به آنتی بادی قرار دارد . به نام CDR

هاپتن

اپی توپ

آنتی ژن

سلول های نوع B

گروه های خونی AB

آنتی ژن :

ماده ای خارجی که به وسیله سیستم ایمنی شناسایی می شود و معمولا از جنس پروتئین می باشد ولی می تواند یک پپتید یا کربوهیدرات نیز باشد .

اپی توپ :

ناحیه ای ازآنتی ژن پروتئینی که با آنتی بادی خاص خود ترکیب می شود .

هاپتن ترکیب شیمیایی کوچکی ازآنتی ژن که به تنهایی قادر به تحریک سیستم ایمنی نیست و نیاز به یک کمک دهنده دارد .

سیستم ایمنی :

a ) سلول های ایمنی نوع T

b ) سلول های مایع یا نیمه جامد نوع B

ما درباره وضع ایمونولوژی سلول در این مسیر نمی دانیم . بنابراین شما باید از نحوه ساخت ایمونوگلوبولین ها توسط B – Cell آگاه شوید و کمک T – Cell در رد کردن ماده خارجی برای تشخیص آنتی بادی ها . ویروس ایدز T – Cell را آلوده کرده و می کشد . و به شدت توانایی آن رادر تولید آنتی بادی ها کاهش می دهد .

ساختار آنتی بادی :

a ) آنتی بادی از 4زنجیره تشکیل شده است . دو زنجیره سنگین و دو زنجیره سبک که به وسیله ی پیوند کووالانسی دی سولفیدی با هم باند شده اند . هر زنجیره سبک شامل دوایمونوگلوبولین حلقوی ( تاخورده ) وهر زنجیره سنگین شامل چهارناحیه هومولوک از زنجیره های پپتیدی سنگین است . که روی هم رفته شکل Y به آنتی بادی می دهند .

b ) ایمونوگلوبولین تاخورده یک نمونه از نواحی هومولوگ پروتئین است . که آن شامل 7 رشته β می شود که به صورت دو صفحه ی 4 تایی قرار گرفته است . 4 تا در یک طرف و3 تا در طرف دیگر که شکل حلقه در می آید .

پیوند کووالانسی دی سولفیدی باعث اتصال زنجیره سنگین و سبک در آنتی بادی می شود .

d ) ( قسمت بسیار متغیر ) ناحیه های CDR اولین ناحیه ایمونوگلوبولین از زنجیره سنگین وسبک هستند که شامل 3 بخش با توالی مخصوص عمده می باشد که توالی عمده ی آن به فاصله یک آنتی بادی با آنتی بادی بعدی یا نزدیک ترین می باشد .

e ) در شکل تاخورده آنتی بادی ، 3 ناحیه بسیار متغیر از هر زنجیره با بخش اتصالی آنتی ژن باند می شود .

f ) اجزاء آنتی بادی : بین محل اتصال آنتی بادی به محل اتصال آنتی ژن ناحیه هایی به نام Fab , Fc وجود دارد . Fab باعث اتصال آنتی بادی به آنتی ژن متصل شوند .

تحقیق درباره پاسخ های فیزیولوژیکی و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی در گیاه گوجه فرنگی تحت تنش آلومینیوم

اختصاصی از کوشا فایل تحقیق درباره پاسخ های فیزیولوژیکی و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی در گیاه گوجه فرنگی تحت تنش آلومینیوم دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 15

پاسخ های فیزیولوژیکی و فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی در گیاه گوجه فرنگی تحت تنش آلومینیوم

چکیده

آلومینیوم از جمله عناصر بسیار سمی است که خاک، آب و زنجیره غذایی را آلوده کرده و تهدیدی جدی برای سلامتی انسان و محصولات کشاورزی است. در پژوهش حاضر کلرید آلومینیوم در هفت غلظت (0، 25، 50، 75، 100 و 125 و 150 میکرومولار) در شرایط کنترل شده بر روی گیاه گوجه فرنگی به مدت 21 روز به کار گرفته شد. نتایج نشان داد تنش آلومینیوم به طور معنی داری محتوی پراکسیداسیون لیپیدهای غشا را افزایش داد که نشان دهنده القا تنش اکسیداتیو توسط آلومینیوم در گیاه گوجه فرنگی است. همچنین میزان پروتئین در هر دو بخش ریشه و برگ روند کاهشی را به طور معنی داری نشان داد. بررسی مکانیسم های دفاعی، از طریق اندازه گیری فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان نشان داد که تنش آلومینیوم فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، کاتالاز (CAT) ، گایاکول پراکسیدازها ( (POX، آسکوربات پراکسیداز (APX)و پلی فنل اکسیداز (PPO) را افزایش داد. تجمع آلومینیوم در برگها ابتدا افزایش و سپس در غلظتهای بالاتر از آلومینیوم کاهش یافت اما در سیستم ریشهای افزایش قابل توجهی در تجمع آلومینیوم در غلظتهای بالای Al (150 میکرومولار آلومینیوم) مشاهده شد. افزایش پراکسیداسیون لیپیدهای غشا در شرایط تنش آلومینیوم، نشان داد که سرکوب رادیکال های آزاد اکسیژن خارج از توان گیاه به خصوص در تیمارهای 75 تا 150 میکرومولار بوده است و القا مکانیسم های دفاع آنزیمی گیاه در مقابل صدمات اکسیداتیو موثر نبوده است. بنابراین استفاده از ترکیبات حفاظتی برون زا می تواند ظرفیت آنتی اکسیدانی این گیاه را در برابر شرایط تنش افزایش دهد.

واژه های کلیدی: آلومینیوم، آنزیم های آنتیاکسیدان، پروتئین، گوجه فرنگی، مالون دی آلدئید

نویسنده مسئول: نشانی پست الکترونیکی: [e-mail]

مقدمه

آلومینیوم سومین عنصر فراوان پوسته زمین (Achary et al.,2008)بعد از اکسیژن و سیلیسیم است (Chen et al., 2010) که تقریبا 7 درصد از جرم پوسته زمین را در بر میگیرد (Giannakoula et al., 2008). با کاهش pH خاک، فعالیت آلومینیوم در خاک و در نتیجه سمیت آن برای گیاه افزایش قابلتوجهی پیدا میکند (Dong et al., 2002) همچنین اسیدی شدن خاک در سراسر جهان در نتیجه فعالیت انسان ها (افزایش آزادسازی آلایندههای صنعتی و استفاده مداوم از کودهای آمونیاکی یا حاوی آمید) در حال افزایش است .(Tabaldi et al., 2009) تنشهای زیستی و غیر زیستی منجر به شکلگیری گونههای اکسیژن واکنشپذیر (ROS) میشود. تولید گونه های اکسیژن فعال سبب پراکسیداسیون لیپیدهای غشاء، تخریب پروتئینها و نوکلئیک اسیدها می شود (Jiang and .Zhang, 2001) گیاهان برای کاهش دادن اثر مخرب گونه های اکسیژن فعال مکانیسم های متفاوتی دارند. از جمله این مکانیسمها میتوان به سیستم دفاع آنتی اکسیدانی اشاره کرد. این سیستم شامل سیستم آنزیمی و غیرآنزیمی است. آنزیمهای آنتی اکسیدان مانند کاتالاز، سوپراکسیددیسموتاز و پراکسیداز در پاکسازی رادیکالهای آزاد اکسیژن در سلول نقش دارند .(Agarwal and Pandey, 2004) در پاسخ به افزایش تولید گونه های فعال اکسیژن، ظرفیت دفاع آنتی اکسیدانی و فعالیت آنزیمهای آنتی اکسیدان افزایش می یابد .(Gressel and Galun, 1994) اولین آنزیم پاکسازی کننده سوپراکسید دیسموتاز است که تبدیل رادیکال سوپراکسید به پراکسیدهیدروژن که یک مولکول با خاصیت غیررادیکالی است را بر عهده دارد. پراکسید هیدروژن تولید شده توسط آنزیم کاتالاز و یا آسکوربات پراکسیداز تبدیل به آب و اکسیژن می شود(Comba et al., 2010) . آنزیم پراکسیداز نقش مهمی را در جاروب کردن پراکسید هیدروژن دارد که این عمل با کمک اسید آسکوربیک به عنوان یک دهنده الکترون برای احیای پراکسید هیدروژن به آب صورت می گیرد. درطی این واکنش اسید آسکوربیک به مونودهیدروآسکوربات تبدیل می شود. گایاکول پراکسیدازها (POX) گلیکوپروتئینهایی هستند که فنلها را مانند یک دهنده هیدروژن مصرف کرده و در فرایندهای نمو، لیگنین سازی، بیوسنتز اتیلن، دفاع و التیام زخمها شرکت میکنند(Verma and Dubey, 2003 ; .Michalak, 2006) تغییرات در میزان فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان در شرایط تنشهای محیطی مختلف گزارش شده است .(Hernandez et al., 2000) همچنین تخریب پروتئین ها و انباشت برخى آمینواسیدهاى آزاد در جهت حفظ وتنظیم فشار اسمزى سلول و کاهش سنتز پروتئین در شرایط تنش مشاهده شده است (Hissao, 1973 ; Moran et al., 1994) . برخى از پژوهشگران رکود سنتز پروتئین را به کاهش تعداد پلى زوم هاى سلولى نسبت داده اند .(Creelman et al., 1990)یکی از واکنشهایی که در حضور انواع اکسیژن فعال سرعت بیشتری پیدا می کند، پراکسیداسیون لیپیدهای غشایی است که باعث تولید آلدئیدهایی مثل مالون دی آلدئید(MDA) و ترکیباتی مثل اتیلن می شوند .(Qiujie et al., 1996) اثر رادیکالهای اکسیژن بر لیپیدها و پراکسیداسیون آنها ناشی از اثر بر پیوندهای دوگانه اسیدهای چرب غیراشباع می باشد که واکنشهای زنجیرهای پراکسیداسیون را تحریک کرده و منجر به تخریب اسیدهای چرب میشوند. رادیکالهای هیدروکسیل و یا اکسیژن یکتایی می توانند با گروههای متیلن اسیدهای چرب غیر اشباع واکنش داده و تولید رادیکالهای لیپید پراکسی و هیدروپراکسی کنند (Bandyopadhyay et al., 1999).

گوجه فرنگی گیاهی با کاربرد فراوان در میان سبزیجات در دوره های متفاوت کشت و زراعت است همچنین بخش وسیعی از این محصول در گل خانه کشت می شود و استفاده از سوبستراهای ویژه و تکنیک های کوددهی و آبیاری در آن درگیر است (Gil et al., 2004 ; Huang and Jin, 2008). بنابراین ریسک تجمع عناصر سنگینی مانند آلومینیوم در این گیاهان افزایش می یابد. در نتیجه نیاز به بررسی پاسخ فیزیولوژیکی محصولات غذایی مانند گوجه فرنگی به سمیت این فلزات ضروری به نظر می رسد. بررسی مکانیسم سازگاری به تنش آلومینیوم، می تواند بینش جدیدی درباره ی فرایند تنش آلومینیوم در این گیاه ایجاد کند و یا حتی مقاومت محصولات را به تنش آلومینیوم بهبود بخشند. هدف از انجام این پژوهش بررسی اثر تنش آلومینیوم برالقاء تنش اکسیداتیو و پراکسیداسیون لیپید، تخریب پروتئین و بررسی سیستم دفاع آنتی اکسیدانی گیاه گوجه فرنگی در غلظت های متفاوت آلومینیوم است.

مواد و روشها

کشت و تیمار گیاه : بذرهای گیاه گوجهفرنگی (Mill. (Lycopersicon esculentum از موسسه بذر و نهال کرج تهیه شد. تعداد 500 عدد بذر یکنواخت و همگن انتخاب شدند و برای جلوگیری از آلودگی قارچی توسط هیپوکلریت سدیم 1 درصد به مدت 10 دقیقه ضدعفونی شدند. پس از این مرحله تعداد 10 عدد بذر درون ظروف پتری سترون حاوی یک لایه کاغذ صافی قرار داده شدند. سپس ظروف پتری فوق با ورق آلومینیومی پوشانده شدند. بعد از 4 روز بذرها جوانه زدند. از بین آنها، بذرهای جوانه زده یکنواخت انتخاب شدند. گیاهکهای 6روزه به گلدانهای حاوی ماسه مرطوب شده با آب مقطر منتقل شدند. در کف گلدانها چندین منفذ کوچک وجود داشت تا آب ماسه در حد ظرفیت مزرعه باشد و سپس گلدانها به شرایط نوری مناسب انتقال داده شدند و به مدت 14 روز با محلول هوگلند آبیاری شدند. زمانی که گیاهان 20 روزه شدند تیماردهی آغاز شد. گیاهان تحت تیمار کلرید آلومینیوم (AlCl3) در غلظت های 0، 25 ، 50 ، 75 ، 100 ، 125 و 150 میکرومولار قرار گرفتند. در طول دوره تیماردهی، هفته ای سه بار گلدان ها با محلول غذایی مورد نظر (محلول هوگلند به همراه تیمارهای کلرید آلومینیوم) آبیاری شدند. برای جلوگیری از انباشته شدن اضافی یون ها در هنگام آبیاری، نیمی از محلول مورد استفاده از ته گلدان ها خارج می شد و در فواصل تیماردهی گلدان ها با آب مقطر آبیاری شدند که این کار از طریق زیرگلدانی صورت می گرفت. درجه حرارت 25 درجه سانتی گراد در روز و 18 درجه سانتی گراد در شب در نظر گرفته شد. طول دوره روشنایی و تاریکی به ترتیب 16 و 8 ساعت تنظیم شد. pH در تمام محلولهای غذایی تهیه شده در حد 5/5 تنظیم گردید. برای به حداقل رساندن اثرات میکروکلیمایی در محیط رشد گیاه در گلخانه گردش وضعی و جابه جایی تصادفی گلدانها به صورت روزانه در دوره رشد انجام پذیرفت. گیاهان 40 روزه جهت سنجشهای بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی برداشت شدند.

سنجش پراکسیداسیون لیپید: اندازهگیری میزان پراکسیداسیون لیپیدهای غشایی به وسیله تست تیوباربیتوریک اسید (TBAT) با سنجش میزان مالوندیآلدئید انجام شد. 2/0 گرم بافت تر برگ و ریشه در 5 میلی لیتر تری کلرواستیکاسید (TCA) 1/0 درصد همگن شده سپس عصاره ی حاصل به فالکون انتقال یافته و به مدت 5 دقیقه در g 6000 سانتریفیوژ شد. به یک میلی لیتر از محلول رویی 4 میلی لیتر تری کلرواستیک اسید 20 درصد که حاوی 5/0 درصد تیوباربیتوریکاسید بود اضافه شد. مخلوط فوق به مدت 30 دقیقه در حمام آب گرم (95 درجه سانتی گراد)، انکوبه گردیدند. سپس مخلوط حاصل بلافاصله در حمام یخ سرد شد و بعد از آن در سرعت g 6000 به مدت 10 دقیقه سانتریفیوژ گردید. میزان جذب مایع رویی در طول موج 532 نانومتر تعیین و جذب ناویژه در 600 نانومتر از آن کسر شد. غلظت مالوندی آلدئید (MDA) با استفاده از ضریب تصحیح (μ mol-1 cm-1) 155/0 محاسبه و براساس واحد میکرومول بر گرم وزن تر (μmol g-1 FW) بیان شد .(Health and Packer, 1968)

سنجش پروتئین : اندام هوایی و ریشه تازه گیاهان پس از توزین ، توسط 2 میلی لیتر بافر فسفات 1/0 مولار (8/6(pH به صورت هموژن درآمد. پس از همگن سازی، هر کدام از نمونه ها به ویال های 2 میلی لیتری منتقل شدند. سپس سانتریفوژ نمونه ها درg 15000 به مدت 12 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد انجام شد. از بخش رویی عصاره جهت سنجش غلظت پروتئین کل عصاره های گیاهی با استفاده از روش برادفورد (1976) استفاده شد (Bradford, 1976).

سنجش فعالیت آنزیم:

سنجش فعالیت آنزیم سوپراکسید دیسموتاز : مخلوط واکنش برای سنجش فعالیت آنزیم شامل بافر فسفات 50 میلی مولار، متیونین 013/0 مولار، EDTA 1/0 میکرومولار و ریبوفلاوین 2 میکرومولار می باشد که در تاریکی کامل نگهداری شد. بلافاصله پس از اضافه کردن ریبوفلاوین، 3 میلی لیتر از آن را درون لوله آزمایش ریخته و به هر لوله 100 میکرولیتر نمونه عصاره پروتئینی اضافه شد. لولههای آزمایش به مدت 16 دقیقه در فاصله 30 سانتیمتری از منبع نور قرار گرفتند و در این فاصله دستگاه اسپکتروفتومتر در طول موج 560 نانومتر و توسط محلول تاریکی به عنوان شاهد تنظیم شد. پس از 16 دقیقه جذب نمونهها در طول موج مذکور خوانده شد. از آنجائیکه یک واحد آنزیم مذکور عبارت است از میزانی از آنزیم که 50 درصد بازداشت ایجاد می کند، فعالیت آنزیم سوپراکسیددیسموتاز براساس واحد آنزیمی به ازای هر میلی گرم پروتئین برای تمام نمونهها محاسبه گردید (Giannopolitis et al., 1997).

سنجش فعالیت آنزیم کاتالاز : بررسی میزان فعالیت آنزیم کاتالاز (CAT) با بررسی کاهش مقدار پراکسید هیدروژن در طول موج 240 نانومتر انجام شد. مخلوط واکنش شامل بافر فسفات 50 میلی مولار (7 pH) و پراکسید هیدروژن 15 میلی مولار بود. واکنش با افزودن 100 میکرولیتر عصارهی آنزیمی در حجم نهایی 3 میلی لیتر آغاز گردید. تغییرات جذب در 240 نانومتر به مدت 3 دقیقه ثبت شد. سپس فعالیت آنزیم به صورت تغییرات جذب در دقیقه به ازای وزن تر بیان گردید .(Dazy et al., 2008)

سنجش فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز: برای سنجش فعالیت آنزیم آسکوربات پراکسیداز، مخلوط واکنش شامل بافر فسفات 250 میلی مولار(7pH )، آب اکسیژنه 2/1 میلی مولار، اسید آسکوربیک 5/0 میلی مولار و EDTA 1/0 میلی مولار بود. با اضافه کردن آب اکسیژنه به مخلوط واکنش فعالیت آنزیمی شروع شد. کاهش جذب نور به علت پراکسیداسیون اسید آسکوربیک در طول موج 290 نانومتر به مدت 2 دقیقه با دستگاه اسپکتروفتومتر خوانده شد. برای محاسبه فعالیت آنزیم از تغییرات جذب در یک دقیقه استفاده شد .(Dazy et al., 2008)

سنجش فعالیت آنزیم گایاکول پراکسیداز: فعالیت آنزیم گایاکول پراکسیداز (GPX)، به صورت زیر مورد ارزیابی قرار گرفت. محیط واکنش شامل بافر پتاسیم فسفات 25 میلی مولار (8/6pH ) و پراکسید هیدروژن 40 میلی مولار و گایاکول 20 میلی مولار بود. واکنش با افزودن 100 میکرولیتر عصاره ی آنزیمی در حجم نهایی 3 میلی لیتر آغاز گردید. افزایش جذب به وسیلهی تشکیل تتراگایاکول در طول موج 470 نانومتر به مدت 3 دقیقه ثبت شد. سپس فعالیت آنزیم به صورت تغییرات جذب در دقیقه به ازای هر گرم وزن تر در دقیقه بیان گردید (Dazy et al., 2008).

سنجش فعالیت آنزیم پلی فنل اکسیداز: سنجش فعالیت آنزیم پلی فنل اکسیداز از روش ریموند (1993) استفاده شد. ابتدا تعدادی لوله آزمایش در حمامی با دمای 40 درجه سانتی گراد گذاشته شد. سپس بافر فسفات 2/0 مولار با 6 pH و پیروگالل 02/0 مولار به هر یک از لولهها افزوده شد. پس از رسیدن دمای لولهها دقیقا به 40 درجه به هر لوله 2/0 میلی لیتر عصاره افزوده شد و تغییرات جذب در 430 نانومتر خوانده شد(Raymond et al., 1993).

سنجش میزان تجمع عنصر آلومینیوم : برای سنجش میزان آلومینیوم ریشه و برگ 5/0 گرم از وزن تر ماده گیاهی (برگ و ریشه) به دقت وزن شد و در بوته چینی قرار داده شد و در دمای 500 درجه سانتی گراد به مدت 4 ساعت در کوره سوزانده شد. سپس خاکستر حاصل در 5 میلی لیتر از اسیدنیتریک غلیظ به مدت 30 دقیقه در دمای اتاق

آنتی اکسیدانها

اختصاصی از کوشا فایل آنتی اکسیدانها دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 17

رنگ ها و طعم ها

ماجرای فیزیک ذرات بنیادی در دهه ۱۹۶۰ به ماجرای خلق مکانیک کوانتومی و آنچه که در جهان فیزیکدانان در دهه های اول قرن بیستم می گذشت بی شباهت نیست. در اواخر دهه ۱۹۶۰ شتاب دهنده های پرانرژی از تصادم الکترون ها و پروتون ها و در برخی موارد ذرات دیگر، صدها ذره بنیادی فراهم کردند تا فیزیکدانان را از غنای آنچه که در زیرلایه های اتم می گذرد آگاه کنند.

● نگاهی به مدل استاندارد ذرات بنیادی در نیمه دوم قرن بیستم پیشرفت های عظیمی در درک ما از جهان و به خصوص در دنیای درون اتم اتفاق افتاد. از یک سو پیشرفت های نظری در مکانیک کوانتومی و به تبع آن در نظریه میدان های کوانتومی و از سوی دیگر انجام آزمایش های بزرگ به وسیله شتاب دهنده های عظیم باعث شد که امروزه بتوانیم ادعا کنیم ساختار بخش عظیمی از ماده قابل رویت در جهان را می دانیم. همچنین می توانیم بگوییم که از میان چهار نیروی مستقل در طبیعت امروز نظریه وحدت یافته ای از دوتای آنها در دست است و سومین نیرو هم به طرز خوبی با آنها تلفیق شده است. اما سئوالات بزرگ تر و اساسی تری پیش روی بشر باز شده است. از یک طرف نیروی چهارم یعنی گرانش تا حدودی رام نشدنی به نظر می رسد. نظریه های ذهنی تری مثل نظریه ریسمان و ابر ریسمان ادعا دارند که شاید بتوانند در آینده هر چهار نیرو را در یک نظریه وحدت یافته توضیح دهند. از سوی دیگر کشفیات کیهان شناسی در اواخر دهه ۹۰ نشان داد که آن چیزی را که ماده قابل رویت در جهان می نامیم و آن را با «مدل استاندارد ذرات بنیادی» توصیف می کنیم، تنها کمتر از پنج درصد جرم کل عالم را تشکیل می دهد و از ۹۵ درصد باقی مانده قسمتی به صورت جرم تاریک است که تنها اثر آن را در سرعت چرخش ستاره ها (مثل خورشید) به دور کهکشان دیده ایم و قسمت بیشتر آن به صورت انرژی تاریک است که باز هم تنها نشانه آن را در افزایش سرعت انبساط عالم کشف کرده ایم و هیچ توجیه نظری که به وسیله عموم فیزیکدانان قابل قبول باشد ارائه نشده است. با وجود تمام این محدودیت ها می توان گفت که «مدل استاندارد ذرات بنیادی» به واقع شاهکاری است که حاصل میلیون ها نفرساعت _ وقت و یک قرن تلاش بشر و عقلانیت مدرن برای کشف رازهای جاودانه خلقت است. ● نخستین ذرات بنیادی ماجرای فیزیک ذرات بنیادی در دهه ۱۹۶۰ به ماجرای خلق مکانیک کوانتومی و آنچه که در جهان فیزیکدانان در دهه های اول قرن بیستم می گذشت بی شباهت نیست. در اواخر دهه ۱۹۶۰ شتاب دهنده های پرانرژی از تصادم الکترون ها و پروتون ها و در برخی موارد ذرات دیگر، صدها ذره بنیادی فراهم کردند تا فیزیکدانان را از غنای آنچه که در زیرلایه های اتم می گذرد آگاه کنند. زمانی که دالتون مدل اتمی نوین خود را در قرن نوزدهم ارائه داد و مندلیف جدول تناوبی عناصر را تنظیم کرد، دانشمندان گمان می کردند که اتم ها، آجرهای ریزسازنده جهان هستند اما این تصور چندان طول نکشید. با کشف الکترون، هسته و پروتون و نوترون درون هسته (که اکثر آنها را مدیون تامسون پدر و پسر و لرد رادرفورد هستیم)، دانشمندان نفس تازه ای کشیدند. آنها توانستند تمام جدول تناوبی عناصر را براساس این ذره توجیه کنند. به نظر می رسید که الکترون، پروتون و نوترون اجزای اصلی سازنده جهان هستند. اما داستان اینجا تمام نمی شود. دیراک که پس از تدوین مکانیک کوانتومی توسط هایزنبرگ و شرودینگر به دنبال آن بود که یک نظریه مکانیک کوانتومی نسبیتی بسازد نسبیت خاص را با مکانیک کوانتومی پیوند بزند، در اواخر دهه ۱۹۲۰ به معادله ای دست یافت که علاوه بر توضیح دینامیک الکترون وجود ذره دیگری را پیش بینی می کرد که تمام خواص اش همانند الکترون اما بارش مخالف آن است. این ذره را پوزیترون نامیدند. پوزیترون پادذره الکترون است، یعنی تمام خواص آن مثل الکترون است و فقط بارهای ذاتی اعداد کوانتومی آن عکس الکترون است، مثلاً بار الکتریکی مثبت دارد و در سال ۱۹۳۱ توسط کارل اندرسون با استفاده از عکس هایی که از تابش کیهانی گرفته بود، کشف شد. نکته جالب تر اینکه معادله دیراک می تواند هر ذره ای را که اسپین یک دوم دارد توصیف کند اسپین خاصیت کاملاً کوانتومی است و مانسته کلاسیکی ندارد و شبیه یک میدان مغناطیسی ذاتی است پس پروتون و نوترون را هم شامل می شود، در نتیجه آنها هم پادذره دارند. ● نظریه میدان های کوانتومی پیشرفت بعدی در درک جهان خرد جهان زیر اتمی زمانی حاصل شد که نشان داده شد در معادله دیراک کوانتیزه کردن معادله شرودینگر برای ذرات اسپین یک دوم یک فوتون پرانرژی فوتون، کوانتوم نور است که اینشتین از آن برای توجیه اثر فتوالکتریک استفاده کرد می تواند یک الکترون و یک پوزیترون خلق کند. البته برای بقای همزمان انرژی و اندازه حرکت، این خلق باید در کنار یک ذره سنگین تر اتفاق بیفتد. به طور مشابه نشان داده شد که الکترون و پوزیترون می توانند به هم برخورد کنند و ضمن نابود شدن فنا شدن یک فوتون پرانرژی تولید کنند. در نظریه میدان های کوانتومی که معادله دیراک صورت خاصی از آن است همه ذرات توسط میدان ها توصیف می شوند، همان طور که فوتون نمایان گر میدان الکترومغناطیسی است، الکترون هم تجلی یک میدان الکترونی و پروتون هم یک میدان پروتونی است. به امکان خلق یا فنای کوانتم های میدان ذرات دومین کوانتیزه شدن» می گویند. ● نیروهای بنیادی در درون هسته اتم ها، پروتون ها و نوترون ها در کنار هم قرار دارند. نوترون ها بی بار هستند اما پروتون ها بار مثبت دارند. دافعه الکتریکی آنها آنقدر زیاد است که باید چیزی بسیار قوی آنها را در کنار هم این گونه آرام قرار داده باشد. نیرویی که «نیروی هسته ای» نام گرفت. فیزیکدان بزرگ ژاپنی یوکاوا این ایده را مطرح کرد که نیروی هسته ای ناشی از تبادل ذره ای به نام مزون بین اجزای هسته پروتون و نوترون است به این ترتیب پای ذرات دیگری هم به میان آمد. در همین زمان ها بود که شتاب دهنده های بزرگ ساخته شدند و ماحصل کار این شتاب دهنده ها کشف صدها ذره گوناگون بود که همه آنها به نوعی لقب «بنیادی» را به همراه داشتند وضع از زمان جدول مندلیف هم بدتر شد. زیرا آن موقع تنها ۹۲ عنصر وجود داشتند و حالا صدها ذره بنیادی. همان طور که بشر توانست این ۹۲ عنصر شیمیایی را با سه ذره الکترون، پروتون و نوترون توضیح دهد، به نظریه دیگری نیاز بود که بتواند این جنگل عظیم ذرات را با چند مدل ساده تفسیر کند. مدل استاندارد ذرات بنیادی توانست چنین کاری را انجام دهد. تاکنون در طبیعت تنها چهار نیروی مستقل شناخته شده است. نیروی گرانش را نیوتن کشف کرد و در نظریه نسبیت عام اینشتین تعمیم یافت. نظریه نسبیت عام یکی از بهترین و کامل ترین نظریه های علمی است که می تواند نیروی گرانش را تا حد بسیار خوبی توضیح دهد. نیروی دیگر، نیروی الکترومغناطیسی است. نیروی الکترومغناطیسی در قرن نوزدهم و با کارهای بزرگانی مثل فارادی، هانری، لورنتس، آمپر، اورستد و... قوام پیدا کرد و سرانجام ماکسول توانست این نظریه ها را وحدت بخشیده و در

دانلود مقاله بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژن B و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک

اختصاصی از کوشا فایل دانلود مقاله بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژن B و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژن B و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک

با استفاده از روش دات بلاتینگ

چکیده:

مقدمه و هدف: بیماری کیست هیداتیک یکی از مهمترین زئونوزهای انگلی است که در مناطق مختلف دنیا از جمله ایران شیوع دارد. استفاده از روش های سرولوژیکی که بتواند با حساسیت و ویژگی بالایی در تشخیص هیداتیدوز بکار رود ارزشمند می باشد. از این روی در این پژوهش، انتی ژن B و آنتی ژن پروتواسکولکس بعنوان دو آنتی ژن اختصاصی انگل، تخلیص شده و سپس با تست دات بلاتینگ با سرم بیماران هیداتیدوزی و غیر هیداتیدوزی مورد ارزیابی قرار گرفته است تا حساسیت و ویژگی این دو آنتی ژن با این روش معرفی گردد.

روش کار: در یک مطالعه تحلیلی مقایسه ای از 22 بیمار تحت عمل جراحی کیست هیداتیک و 12 بیمار غیر هیداتیدوزی نیز که مبتلا به توکسوپلاسموز حاد (4نفر). لیشمانیوز (4نفر) و سستودهای غیر کیست هیداتیک (4نفر) بودند و همچنین 4 فرد نرمال به عنوان سرم کترل، خون گیری به عمل آمد. مایع کیست هیداتیک کبد وریه گوسفند حاوی پروتواسکولس استخراش شده و سپس این مایع جهت تهیه آنتی ژن B تحت تخلیص نسبی و عبور از ستون پروتئینA قرار گرفت و محتوای سلولی پروتواسکولکس نیز تحت عنوان آنتی ژن پروتواسکولکس تهیه شد. با متد دات بلات آنتی ژن های B و پروتواسکولکس با سرم های هیداتیکی و کنترل واکنش داده و حساسیت و ویژگی این آنتی ژن ها ارزیابی گردید.

نتایج: نتایج حساسیت و ویژگی آنتی ژن B به ترتیب 9/90% و 81% و آنتی ژن پروتواسکولکس به ترتیب 100% و 63% در متد دات بلات برآورد شد.

نتیجه نهائی: ارزیابی حساسیت و ویژگی آنتی ژن B و آنتی ژ« پروتواسکولکس با استفاده از دات بلاتینگ نشان داد آنتی ژن B از ارزش بالایی در تشخیص هیداتیدوز برخوردار است و دات بلاتینگ با استفاده از آنتی ژن B می تواند به عنوان یک روش تشخیصی ارزشمند بکار گرفته شود.

کلید واژه ها: آنتی ژن بی / آنتی ژن پروتواسکولکس / ایمنوبلاتینگ / کیست هیداتیک

مقدمه:

کیست هیداتیک که توسط مرحله لاروی سستود سگ و سگ سانان به نام Echinococcus granulosus ایجاد می شود یکی از مهمترین زءونوزهای انگلی است که در مناطق مختلف دنیا نظیر اروپا، آسیا مرکزی، چین، استرالیا، افریقا، امریکا و خاورمیانه از جمله ایران شیوع دارد (1.2).

ایران از مناطق هیپروآندمیک بیماری بوده و موجب ضررهای اقتصادی به دلیل آلودگی در دام و آسیب های شدید جسمی، روانی و اقتصادی به دلیل آلودگی انسان           می شود (3). تشخیص و تفسیر بالینی هیداتیدوز بیشتربر اساس تصاویر رادیولوژیک، سیتی اسکن یا سونوگرافی می باشد که با مشکلاتی همراه بوده و در تشخیص دقیق ماهیت این ضایعات ناتوان است (4). بنابراین روش های ایمونولوژیک در تشخیص آزمایشگاهی هیداتیدوز از اهمیت و اعتبار ویژه ای برخوردارند.

تقریباً اکثر آزمایشات رایج سرولوژیک از قبیل

Casoni و Complement Fixation Test(CFT)

Indirect Hemmaglutination Antibody Test (IHA)

Latex Agglutination (LA)

Immuno Fluorescent Antibody Test (IFAT)

Counter Immuno Electrophoresis (CIEP)

Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

از آغاز تا به امروز برای تشخیص این بیماری بکار رفته اند (5). در کشور ما نیز بطور معمول، روش IFAT در آژمایشگاهها انجام می شود که دارای مثبت و منفی کاذب   می باشد و علاوه بر آن در شرایط خاص، جدید نمودن بیماران هیداتیکی که بیماری آنها با کیست جدید مجدداً فعال شده باشد، از بیماران جراحی شده فاقد کیست جدید مشکل بوده و روشIFAT   فاقد امان تمایز اینگونه بیماران است زیرا با این روش ا«تی بادی که بر ضد مجموعه آنتی ژن پروتواسکولکس وجود دارد، اندازه گیری می شود که برای کل بیماران هیداتیدوزی تا مدتها پس از عمل نیز مثبت کاذب نشان میدهد. همچنین مایع کیست که به طور ممعمول به عنوان آنتی ژن در روشهایی که نام برده شد مورد استفاده قرار می گیرد، دارای اجزا و ترکیبات مختلفی است که بعضی از آنها فاقد حساسیت و ویژگی لازم می باشند (6). بنابراین لزوم تائید بیماری توسط یک تست سرولوژی دقیق امری ضروری به نظر می رسد. در این راستا تعیین آنتی ژنی که از نظر ویژگی و حساسیت بتواند چنین هدفی را برآورده کند از اهمیت خاصی برخوردار است. از این رو در این پژوهش، آنتی ژن B و آنتی ژن پروتواسکولکس بعنون دو آنتی ژن اختصاصی انگل انتخاب شده و سپس توسط دات بلاتینگ ارزیابی گردیدند.

19 صفحه فایل Word